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细胞转染

常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,

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稳定转染

稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染的效率低1到2个数量级。

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细胞克隆(集落)形成

单个细胞在体外增殖6代以上(时间约1周以上),其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力强弱。细胞培养环境的改变或药物、基因等外源性因素的作用能导致细胞克隆形成能力以及细胞集

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常见的细胞污染检测方法你知道几种?如何检测细胞是否被污染?

细胞培养技术在生物研究领域内是必不可少的核心环节,在培养过程中面临的一个严重问题就是细胞污染,其中支原体是最主要的污染源。

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稳转细胞株构建

脂质体介导转染,将目的基因导入细胞48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系

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