Coelenterazine 400a 腔肠素400a-常用生化试剂-试剂-生物在线
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Coelenterazine 400a 腔肠素400a

Coelenterazine 400a 腔肠素400a

商家询价

产品名称: Coelenterazine 400a 腔肠素400a

英文名称: Coelenterazine 400a 腔肠素400a

产品编号: 40905ES02

产品价格: 0

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T13:09:52

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Coelenterazine 400a 腔肠素400a


产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Coelenterazine 400a 腔肠素400a

40905ES02

1×500 μg

789.00

40905ES03

2×500 μg

1499.00

 

背景描述

 

腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480 nm。

腔肠素作为水母发光蛋白复合物(Aequorin)的组成成分只有与钙离子(Ca2+)结合后,才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。其具有以下几个优点1)能检测较大范围的Ca2+浓度0.1-100 μM2)样品无自体荧光,背景荧光较低尽管信号较荧光钙离子指示剂弱,但信噪比更高,因此具有较高灵敏度3)Aequorin能够稳定维持在细胞内,能够进行数小时至数天Ca2+的监测。

腔肠素具有能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET)的特性在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光能量转移到EYFP增强的黄色荧光蛋白,发出绿光(~530 nm)。通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系研究蛋白-蛋白之间的相互作用。BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量

 

主要应用

 

活体成像;报告基因检测;检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平细胞和组织内的超氧阴离子过氧化亚**阴离子能够增强腔肠素在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光高通量筛选监测活细胞内钙离子水平

 

产品描述

 

腔肠素400a(Coelenterazine 400a系天然腔肠素衍生物,是海肾荧光素酶(Rluc)的良好底物,但不能被Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc氧化。它的最大发射波长在400 nm左右,对GFP受体蛋白的信号干扰最小,使得其成为BRET研究的重要腔肠素类底物。

 

产品性质

 

英文别名(English synonym)

DeepBlueCTMDi-dehydro Coelenterazine

CAS号(CAS NO.)

70217-82-2

分子式(Formula)

C26H21N3O

分子量(Molecular weight)

391.48 g/mol

外观(Appearance)

黄色至橘色粉末

溶解性(Solubility)

溶于甲醇和乙醇,不溶于DMSO

纯度(Purity)(TLC

>98%

结构(Structure)

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运输和保存方法

 

冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体环境下,避免接触空气。有效期1年。

 

腔肠素400a工作液的配制

 

腔肠素400a溶解特性不溶于水。目前毒性最低的溶剂是100%乙醇,可配制浓度为0.1-1 mg/ml。加入pH低于7.0的酸性缓冲液(碱性pH会快速降解底物)稀释成低浓度工作液。切忌溶于DMSO。

腔肠素400a保存特性建议溶液现配现用!体外实验,需将稀释后的工作液室温放置20-30 min,方可稳定工作。该工作液可室温稳定放置3-4 h,有非常微弱的信号衰减发生。不建议储存液-20℃或更低温度保存,因为其高能量的二氧环丁酮结构即使在低温的情况下也会发生降解,导致荧光强度明显变弱。短时间保存条件:-70℃避光保存于塑料管内(溶液中不含有Ca2+),且有惰性气体保护。

腔肠素工作液的配制称取1 mg腔肠素400a粉末溶解于1 ml乙醇(或甲醇)中配置成浓度为1 mg/ml的母液。在使用时需将液用合适的缓冲液比如PBS稀释成需要浓度的工作液。比如常用的工作液浓度是100 μM,可使用391.5ul 的1 mg/ml的母液用PBS稀释到10ml,得到一个100uM的溶液。

 

BRET 生物发光共振能量转移(可根据具体实验发生变动)

 

详细步骤可参考文献:Gersting SW, et al.